您當前的(de)位置: 首頁  -  新聞資訊  -  詳細內(nèi)容

液相色譜儀6大檢測器及其适用範圍比較

作者:英納氏            發布時間:2022-08-02
 

液相色譜儀6大檢測器是什麽?檢測器的(de)作用是将色譜柱流出物中樣品組成和(hé)含量的(de)變化轉化為(wèi)可(kě)供檢測的(de)信号,從而定性定量分析待測組分。需要掌握不同檢測器的(de)原理(lǐ)。液相色譜儀常用的(de)檢測器包括紫外檢測器、熒光檢測器、示差折光檢測器、蒸發光散射檢測器、化學(xué)發光檢測器、質譜檢測器等。

紫外檢測器(UVD)

  是目前液相色譜中應用最廣泛的(de)檢測器。自(zì)然界中大部分有(yǒu)機(jī)物和(hé)部分無機(jī)物都具有(yǒu)紫外吸收能力,UV檢測器根據化合物對紫外光的(de)吸收能力,通過二極管将光信号轉變為(wèi)電信号,從而進行(xíng)分析。它有(yǒu)兩個流通池,一(yī)個作參比,一(yī)個作測量用,光源發出的(de)紫外光照射到流通池上,若兩流通池都通過純的(de)均勻溶劑,則它們(men)在紫外波長(cháng)下幾乎無吸收,光電管上接受到的(de)輻射強度相等,無信号輸出。當組分進入測量池時,吸收一(yī)定的(de)紫外光,使兩光電管接受到的(de)輻射強度不等,這時有(yǒu)信号輸出,輸出信号大小與組分濃度有(yǒu)關。

  使用過紫外檢測器的(de)人應該都會發現,很多标準方法中都是以254nm作為(wèi)檢測波長(cháng)的(de),那為(wèi)什麽是這個波長(cháng)呢(ne)?因為(wèi)在液相色譜檢測器的(de)發展過程中使用最久的(de)是低(dī)壓汞燈,而汞的(de)最大發射波長(cháng)是253.7nm,也就是說在254nm波長(cháng)下,燈能量最高(gāo),檢測靈敏度最好。但現階段,很多紫外檢測器采用的(de)是氘燈,這時候254nm的(de)檢測波長(cháng)其實意義不大,氘燈的(de)使用範圍一(yī)般是190-800nm,需要考慮化合物的(de)最大吸收波長(cháng)并且避開流動相的(de)吸收幹擾來選擇合适的(de)檢測波長(cháng)。這就限制了其流動相的(de)選擇範圍,一(yī)般檢測波長(cháng)要避開溶劑截止波長(cháng)20nm以上。

  熒光檢測器(FLD)

  是目前液相色譜靈敏度最高(gāo)的(de)檢測器,應用廣泛,選擇性強。适用于能激發熒光的(de)化合物。很多與生命科(kē)學(xué)有(yǒu)關的(de)物質,如(rú)氨基酸、胺類、維生素、甾族化合物及某些代謝藥物都可(kě)以用熒光法檢測。熒光檢測器在生物樣品痕量分析中具有(yǒu)重要作用,尤其在用熒光衍生後,可(kě)以檢測很微量的(de)氨基酸和(hé)肽。在實驗過程中需要嚴格脫氣,因為(wèi)系統中殘留的(de)氧氣會引發熒光淬滅反應,造成峰面積大幅下降甚至不出峰。

  示差折光檢測器(RID)

  是一(yī)種通用型檢測器,利用物質的(de)折光效應,對所有(yǒu)物質均有(yǒu)響應,隻要被測組分與洗脫液的(de)折光指數有(yǒu)差别就可(kě)使用。生命科(kē)學(xué)中常遇到各類糖類化合物、脂肪烷烴等,沒有(yǒu)紫外吸收,一(yī)般常用示差折光檢測器。它的(de)通用性比UVD廣,但靈敏度要低(dī),對溫度變化敏感,是所有(yǒu)檢測器中對溫度要求最高(gāo)的(de)。另外,不同的(de)流動相比例,其密度或者折光系數不同,如(rú)果流動相比例發生改變,則會引起基線的(de)持續變化,因此示差折光檢測器隻能采用等度洗脫,不能采用梯度洗脫,這也限制了它的(de)使用。

  蒸發光散射檢測器(ELSD)

  也是一(yī)種通用型的(de)檢測器,原理(lǐ)是利用光散射效應,可(kě)檢測揮發性低(dī)于流動相的(de)任何樣品,通過霧化器去(qù)除溶劑,讓化合物形成懸浮顆粒,從而形成散射效應。ELSD靈敏度比RID高(gāo),對溫度變化不敏感,基線穩定,可(kě)用于梯度洗脫,并且可(kě)在沒有(yǒu)标準品和(hé)化合物結構參數未知的(de)情況下檢測未知化合物,但不能使用不揮發的(de)鹽類溶劑,而要用醋酸铵之類的(de)揮發性緩沖鹽來代替。現在ELSD已被廣泛應用于碳水化合物、類脂、脂肪酸和(hé)氨基酸、藥物以及聚合物等的(de)檢測。

  化學(xué)發光檢測器(CD)

  化學(xué)發光檢測器是近年(nián)來發展起來的(de)一(yī)種快速、靈敏的(de)新型檢測器,因其設備簡單、價廉、線性範圍寬等優點。其原理(lǐ)是基于某些物質在常溫下進行(xíng)化學(xué)反應,生成處于激發态勢反應中間體或反應産物,當它們(men)從激發态返回基态時,就發射出光子(zǐ)。由于物質激發态的(de)能量是來自(zì)化學(xué)反應,故叫作化學(xué)發光。當分離(lí)組分從色譜柱中洗脫出來後,立即與适當的(de)化學(xué)發光試劑混合,引起化學(xué)反應,導緻發光物質産生輻射,其光強度與該物質的(de)濃度成正比。該檢測器不需要光源,也不需要複雜的(de)光學(xué)系統,隻要有(yǒu)恒流泵,将化學(xué)發光試劑以一(yī)定的(de)流速泵入混合器中,使之與柱流出物迅速而又均勻地(dì)混合産生化學(xué)發光,通過光電倍增管将光信号變成電信号,就可(kě)進行(xíng)檢測。這種檢測器的(de)最小檢出量可(kě)10-12g。

  質譜檢測器(MSD)

  也是一(yī)種通用型檢測器,在靈敏度、選擇性、通用性及化合物的(de)分子(zǐ)量和(hé)結構信息的(de)提供等方面都有(yǒu)突出的(de)優點。但它的(de)昂貴操作費用和(hé)複雜性在一(yī)定程度上限制了它的(de)推廣應用。理(lǐ)解了這些檢測器的(de)原理(lǐ)可(kě)以幫助我(wǒ)們(men)在實驗中更好地(dì)選擇和(hé)使用檢測器,更高(gāo)效率地(dì)完成檢測任務。

以上就是小編為(wèi)大家帶來的(de)解析,看完這篇文章(zhāng)大家是不是對液相色譜儀又有(yǒu)了進一(yī)步的(de)了解?


湖北(běi)英納氏生物科(kē)技有(yǒu)限公司

027-88189299

中國(guó)-湖北(běi)省-武漢市(shì)

Email:innerse@innersebio.com